A.4ε-聚赖氨酸盐酸盐含量的测定

利用高效液相色谱测定ε-聚赖氨酸盐酸盐的含量。

A.4.2.1 磷酸氢二钾。

A.4.2.2 硫酸钠。

A.4.2.3磷酸。

A.4.2.4乙腈。

高效液相色谱仪：配有紫外检测器，或其他等效的检测器。

A.4.4.1 检测波长：215 nm；

A.4.4.2 色谱柱：C18色谱柱，柱为4.6 mm×250 mm。或其他等同分离效果的色谱柱和色谱条件。

A.4.4.3 流速：0.4 mL/min；

A.4.4.4 定量进样器100 μL。

A.4.5.1 流动相的制备

将1.7 g的磷酸氢二钾和1.42 g的硫酸钠溶于800 mL的水中，用磷酸调pH至3.4后，用水定溶至1000 mL，取此溶液920 mL加入80 mL乙腈，混匀。用0.45 μm的膜过滤器过滤。

A.4.5.2 标准样品溶液的制备

称量约20.00 mg ε-聚赖氨酸盐酸盐标准样品，加入到25 mL的容量瓶中，加流动相到刻度下1 cm处超声10 min，待冷至室温用流动相定容至刻度混合均匀。将此溶液用0.45 μm的膜过滤器过滤，待用。

A.4.5.3 试样溶液的制备

称量约20.00 mg试样，加入到25 mL的容量瓶中，加流动相到刻度下1 cm处超声10 min，待冷至室温用流动相定容至刻度混合均匀。将此溶液用0.45 μm的膜过滤器过滤，待用。

A.4.5.4测定

分别向液相色谱仪注入标准样品溶液和试样溶液，记录主峰的峰面积，进样量为20 μL。

ε-聚赖氨酸盐酸盐含量（以干品计）的质量分数w1，按公式（A.1）计算：

w1 = [（Ws × Ps / Wu） （Ru / Rs）×100 %]÷（1－w2）………………（A.1）

式中：Ws——制备标准样品溶液所用的ε-聚赖氨酸盐酸盐标准样品的质量（mg）；

Ps——制备标准样品溶液所用的ε-聚赖氨酸盐酸盐标准样品含量（%）；

Wu——试样溶液中试样的质量（mg）；

Rs——标准样品溶液中主峰面积的响应值；

Ru——试样溶液中主峰面积的响应值；

w2——A.5中测得的干燥减量的质量分数。

注：系统适用性为重复注入标准样品溶液三次，所得响应面积的相对平均偏差小于1.0%。

A.5干燥减量的测定

按GB 5009.3中的法，直接干燥法进行测定。

A.6pH的测定

试样溶液为10 g/L水溶液，采用酸度计进行测定。