溶菌酶 - 制法

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• 溶菌酶在等电点以下较广泛的pH范围内，分子带正电荷，可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上，洗脱后盐析，可得溶菌酶沉淀，再进行精制可得成品。

• 将新鲜蛋清540kg，在5N10℃下，加入到已处理好的80kg 724树脂中，搅拌吸附6h，在0～5℃静置过夜。倾出上层蛋清，树脂离心甩干，用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白，然后将树脂装入柱内，用0. 15mol／L、pH6.5磷酸缓冲溶液约150L洗涤树脂，再用约600L的10%硫酸铵溶液洗脱，收集洗脱液。洗脱液中加硫酸铵，使最终含硫酸铵量为40%，有白色沉淀生成，冷处放置过夜。虹吸上层清液，沉淀吸滤抽干，再用1倍蒸馏水溶解沉淀呈稀糊状，然后装入透析袋，在约5℃的条件下，对蒸馏水透析24h左右，中间换水2～3次。离心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次。洗液与离心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol／L氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，使pH上升到8.0～9．O，如有白色沉淀，即离心除去。然后用3mol／L盐酸调pH为5．O，冷冻干燥，即得白色片状溶菌酶。也可将离心液用3mol／L盐酸调pH3.5，在搅拌下缓慢加入5%的固体氯化钠，在约5℃的温度下静置48h，离心，沉淀用O℃丙酮洗涤，干燥，即得溶菌酶。