本发明公开了从维生素C一步法制备3－O－烷基抗坏血酸醚的分离纯化方法。该方法包括如下步骤：维生素C、碱、烷基化试剂在溶剂中进行反应，合成3－O－烷基抗坏血酸醚；反应结束，回收反应溶剂，残余物加水稀释，上强碱性阴离子交换树脂柱进行离子交换，水洗，至流出液pH≤8；再用稀酸洗柱，将含有3－O－烷基抗坏血酸醚的流出液合并在一起，最后流出液中没有3－O－烷基抗坏血酸醚时即可停止洗脱；洗脱结束后，将洗脱液进行减压浓缩和结晶，得到纯化的3－O－烷基抗坏血酸醚。本发明采用了离子交换的分离方法，避免使用大量易燃易爆的有机溶剂，安全性高，提纯分离效果好，节约成本