5000(C/W) (Au/As)

C: 为标准溶液中水飞蓟宾的浓度 (mg/ml); W: 样品制备液中所用干燥水飞蓟的重量 (mg); Au和As分别为样品制备液和标准制备液的吸收度。

5. HPLC法测定水飞蓟素的含量 (INA法)

色谱条件: 柱: YMC-Mark ODS C18 5u 4.6×150mm(或Phenomenex Luna C18 5u 4.6×150mm); 流动相: A液: 5ml磷酸加入995ml甲醇-水溶液(20:80), B液: 5ml磷酸加入995ml甲醇-水溶液 (80:20), 按表7-1程序洗脱; 流速: 1.0ml/min; 柱温: 40C; 检测波长: 288nm; 进样量: 10μl。

标准品溶液的制备: 精密称取真空干燥的水飞蓟宾10.00mg, 用甲醇溶解, 并定容至25ml, 即为对照品溶液。按1:2, 1:10, 1:25, 1:50比例稀释。

供试品溶液的制备: 药材 精密称取约10g药材细粉, 用100ml己烷于索氏提取器在水浴上提取4小时至色淡 (或无色), 提取液弃, 药渣挥干溶剂, 残渣加入90ml甲醇置水浴上回流提取8小时, 提取液冷却后定量至100ml, 稀释25倍, 过滤, 滤液即为供试品溶液。

提取物 精密称取提取物粉末70mg(至0.1mg), 加70ml甲醇超声提取20分钟,冷却, 定容至100ml, 滤过。

测定法: 对照品溶液、提取溶剂、供试品溶液分别进样, 见图7-2。以标准品峰面积对浓度绘制曲线, 水飞蓟宾A、B的线性相关系数应不小于0.999, 分离度不小于1.8。各组份的相对保留时间见表7-2。